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糖尿病是一种由于体内胰岛素绝对或相对缺乏而引起的以糖代谢紊乱为主的全身性疾病,它有一遗传学基础,以肥胖、感染、
妊娠等应激状态为诱因.其内分泌变化主要是胰岛素分泌不足引起的糖代谢紊乱为中心及脂肪代谢和蛋白质代谢紊乱,最后引起水
电解质失衡和酸碱平衡失调,累及全身各个脏器的综合性疾病,尽管糖尿病的代谢机理及真正病因还不太清楚,但临床认为在病程
中存在着不同程度的血液流变学改变。为此,选择了50例糖尿病人进行了血液流变学血脂的测定,并与60例健康人进行了比较,
结果表明糖尿病人血液流变学各项指标均较健康人增多。糖尿病人血液高粘型最突出,占86%,高红细胞压积型次之,占64%,全
异常型占42%,近正常型占10%,全正常型无。由此,结果可见:糖尿病人与血液流变学的异常改变以全血糖粘度升高内显著,血
浆粘度升高。次之,全血比粘度的升高又以低切变率下的粘度升高为显著。低切粘度的升高反映红细胞的聚集性增强,高切粘度
的升高使血液流动缓慢,红细胞的变形能力降低,微循环血管发生闭塞或血流不畅,使局部组织缺氧,使红细胞聚集性增强。红
细胞表面带电荷数减少,糖尿病人红细胞电泳时间明显延长。糖尿病患者,血液粘滞性增高,纤维蛋白原水平上升,且血小板粘
附性增加,除血流方程K值增加不明显外,血球压积,全血粘度,还原粘度,血浆粘度,红细胞电泳,纤维蛋白原,血沉均明显增
高。
总之,糖尿病患者的血液流变学变化部分明显,特别是微循环障碍时更是如此,因此患者微血管病变是由于血液流变学异常
引起的主要原因。
PCR技术在人类传染病诊断中的应用
山东省济南市第三人民医院 胡廷芹
山东省济南市电信局门诊部 董丽玲
传染病的病原学检查,对临床正确诊断的建立,治疗方法的制定具有重要意义。传统的实验室病原学检测大多是生物化学免疫
方法,对病原体的基因产物(蛋白质),以及患者对这些蛋白所产生的特异性抗体进行检查,或者使用不同的方法分离培养病原
微生物,进一步用光镜、免疫学、生物化学等方法进一步鉴定。这些实验技术,有的对标本的采集转送要求条件苛刻,有的试验
复杂周期长,有的由于标本干燥变质固定等因素而丧失了检测的机会,远远不能适应临床诊断治疗的迫切要求。
近年来,由于DNA研究飞跃发展,分子生物技术渗透到生命科学各个领域,同样也给传染病的病原学诊断技术的革新以强大的
推动力。特别是近年发展的聚合酶链反应(PCR)体外基因扩增技术。该技术是利用DNA天然复制双螺旋结构的原理,科学地设计
了变性,退火延伸三步法,通过数十个循环周期,几个分子的DNA片段,至少可扩增10—10倍,使极微量的核酸分子扩增到极易
检测的程度。无疑,对传染病的病原体从基因水平而不是表型水平进行快速特异的鉴定,是目前最敏感的检测手段。
PCR技术可以广泛的应用于病人的血、尿、粪便、分泌物、体液涂片等,活检标本,尸解标本检查,也可用于实验室组织培
养,细菌培养的标本检查,甚至污染的水,食物样品的检查,特别是标本不适合于进行细菌、病毒分离培养时,如分离培养过分
昂贵,分离培养条件过分苛刻,成功可能性很小时,标本干燥,变性,已经固定,标本过少,均可使用PCR技术进行病原学检测。
保存标本的抗原性是免疫学检测方法的基本要求,而PCR技术的检测的主要目的是DNA,因此在标本抗原破坏,甚至发生变性时,
也往往有足够的DNA片段保留下来,可以进行PCR基因扩增检测,因此可以弥补传统的试验技术的缺陷和不足,减少了工作量,又
大大缩短了实验周期,能够满足临床诊断和治疗,为临床的病原学诊断提供了快速,可靠的依据。
特异性强,敏感度高是PCR检测感染因子所具有的显著特点。由于传统的实验室检测技术主要是检测病原体的表型,如血清
型、生化活性,毒素的产生,药敏特性等。PCR技术可以从基因水平区分表型类似的不同菌株,检测细菌是否含有产生某种毒素或
酶的基因,确定细菌的抗药性等。免疫学检测在很多传染病的防治中占有重要地位,但PCR检测的特异性和敏感性远远高于免疫血
清学检查,在及时发现带毒素者,潜伏期患者中具有其它技术不能代替的位置。所以PCR技术在传染病的病原学诊断中将会有更多
的发展和更广泛普及的应用。
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